Giya sa Siyensiya sa Ting-init: Kon ang 40°C nga Heat Wave Makatagbo sa mga Eksperimento sa Molekular

Nagpadayon ang taas nga temperatura sa halos tibuok China bag-ohay lang. Niadtong Hulyo 24, ang Shandong Provincial Meteorological Observatory nagpagawas og dalag nga alerto sa taas nga temperatura, nga nagtagna sa temperatura nga "sama sa sauna" nga 35-37°C (111-133°F) ug 80% nga humidity sulod sa sunod nga upat ka adlaw sa mga lugar sa sulod sa nasud. Ang temperatura sa mga lugar sama sa Turpan, Xinjiang, hapit na moabot sa 48°C (111-133°F). Ang Wuhan ug Xiaogan, Hubei, ubos sa orange nga alerto, nga ang temperatura molapas sa 37°C sa pipila ka mga lugar. Niining naglagiting nga kainit, ang mikroskopikong kalibutan sa ilawom sa nawong sa mga pipette nakasinati og dili kasagaran nga mga kagubot—ang kalig-on sa mga nucleic acid, ang kalihokan sa mga enzyme, ug ang pisikal nga kahimtang sa mga reagents tanan hilom nga natuis sa kainit.

Ang pagkuha sa nucleic acid nahimong lumba batok sa panahon. Kung ang temperatura sa gawas molapas sa 40°C, bisan pa nga naka-on ang air conditioner, ang temperatura sa operating table kasagaran molapas sa 28°C. Niining panahona, ang mga RNA sample nga gibiyaan sa bukas nga lugar madunot og doble ang kapaspas kaysa sa tingpamulak ug tingdagdag. Sa magnetic bead extraction, ang buffer solution masuhop sa lokal tungod sa paspas nga volatilization sa solvent, ug ang mga kristal dali nga mo-precipitate. Kini nga mga kristal hinungdan sa dagkong pag-usab-usab sa kahusayan sa pagkuha sa nucleic acid. Ang volatility sa mga organic solvent dungan nga motaas. Sa 30°C, ang gidaghanon sa chloroform volatilization motaas og 40% kon itandi sa 25°C. Atol sa operasyon, kinahanglan nga sigurohon nga ang gikusgon sa hangin sa fume hood kay 0.5m/s, ug gamita ang nitrile gloves aron mapadayon ang epektibo sa pagpanalipod.

Ang mga eksperimento sa PCR nag-atubang ug mas komplikado nga mga kagubot sa temperatura. Ang mga reagent sama sa Taq enzyme ug reverse transcriptase sensitibo kaayo sa kalit nga pag-usab-usab sa temperatura. Ang condensation sa mga bungbong sa tubo human makuha gikan sa -20°C freezer mahimong hinungdan sa sobra sa 15% nga pagkawala sa kalihokan sa enzyme kung kini mosulod sa sistema sa reaksyon. Ang mga solusyon sa dNTP mahimo usab nga magpakita sa mamatikdan nga pagkadaot pagkahuman sa 5 minuto nga pagkaladlad sa temperatura sa kwarto (>30°C). Ang operasyon sa instrumento mabalda usab sa taas nga temperatura. Kung ang temperatura sa palibot sa laboratoryo >35°C ug ang clearance sa heat dissipation sa instrumento sa PCR dili igo (<50 cm gikan sa bungbong), ang kalainan sa internal nga temperatura mahimong moabot hangtod sa 0.8°C. Kini nga paglihis mahimong hinungdan sa pagkunhod sa kahusayan sa amplification sa ngilit sa usa ka 96-well plate og sobra sa 40%. Ang mga dust filter kinahanglan nga limpyohan kanunay (ang pagtapok sa abog makapakunhod sa kahusayan sa heat dissipation og 50%), ug ang direkta nga air conditioning kinahanglan nga likayan. Dugang pa, kung maghimo mga eksperimento sa PCR sa tibuok gabii, likayi ang paggamit sa instrumento sa PCR isip usa ka "makeshift refrigerator" aron tipigan ang mga sample. Ang pagtipig sa 4°C sulod sa sobra sa 2 ka oras mahimong hinungdan sa pagporma sa kondensasyon human masirado ang gipainit nga taklob, nga makapalasaw sa sistema sa reaksyon ug posibleng makadaot sa mga metal module sa instrumento.

Nag-atubang sa padayon nga mga pasidaan sa taas nga temperatura, ang mga laboratoryo sa molekula kinahanglan usab nga mopalanog og alarma. Ang bililhong mga sample sa RNA kinahanglan tipigan sa likod sa usa ka -80°C nga freezer, nga ang pag-access limitado sa mga panahon nga taas ang temperatura. Ang pag-abli sa pultahan sa usa ka -20°C nga freezer labaw sa lima ka beses sa usa ka adlaw makapasamot sa pag-usab-usab sa temperatura. Ang mga kagamitan nga nagpatunghag taas nga kainit nanginahanglan labing menos 50 cm nga wanang sa pagpaagas sa kainit sa duha ka kilid ug likod nga mga kilid. Dugang pa, girekomenda nga usbon ang eksperimental nga oras: 7:00-10:00 AM alang sa mga operasyon nga sensitibo sa temperatura sama sa RNA extraction ug qPCR loading; 1:00-4:00 PM alang sa dili eksperimental nga trabaho sama sa pag-analisar sa datos. Kini nga estratehiya epektibo nga makapugong sa mga peak sa taas nga temperatura nga makabalda sa mga kritikal nga lakang.

Ang mga eksperimento sa molekula atol sa kainit usa ka pagsulay sa teknik ug pailub. Ubos sa walay hunong nga adlaw sa ting-init, tingali panahon na nga ibutang ang imong pipette ug dugangan og dugang nga kahon sa yelo ang imong mga sample aron ang instrumento makapagawas og dugang kainit. Kining pagtahod sa pag-usab-usab sa temperatura mao gyud ang labing bililhon nga kalidad sa laboratoryo atol sa naglagiting nga mga bulan sa ting-init—kay sa 40°C nga kainit sa ting-init, bisan ang mga molekula nanginahanglan og maampingong gibantayan nga "artipisyal nga polar nga rehiyon."