Giya sa Siyensiya sa Ting-init: Sa dihang ang 40°C Heat Wave Makatagbo sa Molecular Experiments

Ang taas nga temperatura nagpadayon sa kadaghanan sa China bag-o lang. Kaniadtong Hulyo 24, ang Shandong Provincial Meteorological Observatory nag-isyu sa usa ka dalag nga taas nga temperatura nga alerto, nga nagtagna sa "sama sa sauna" nga temperatura nga 35-37 ° C (111-133 ° F) ug 80% nga humidity sa sunod nga upat ka adlaw sa mga lugar sa yuta. Ang temperatura sa mga lugar sama sa Turpan, Xinjiang, nagkaduol na sa 48°C (111-133°F). Ang Wuhan ug Xiaogan, Hubei, ubos sa usa ka orange nga alerto, nga adunay temperatura nga molapas sa 37°C sa pipila ka mga lugar. Niining makapaso nga kainit, ang mikroskopikong kalibotan ilalom sa nawong sa mga pipette nakasinati ug talagsaong mga kasamok—ang kalig-on sa mga nucleic acid, ang kalihokan sa mga enzyme, ug ang pisikal nga kahimtang sa mga reagents hilom nga gituis sa heatwave.

Ang pagkuha sa nucleic acid nahimong usa ka lumba batok sa panahon. Kung ang temperatura sa gawas molapas sa 40 °C, bisan kung naka-on ang air conditioner, ang temperatura sa operating table kanunay nga molupad labaw sa 28 °C. Niining panahona, ang mga sample sa RNA nga nahabilin sa bukas nga pagkadaot labaw sa doble nga paspas kaysa sa tingpamulak ug tingdagdag. Sa magnetic bead extraction, ang buffer solution kay locally saturated tungod sa accelerated volatilization sa solvent, ug ang mga kristal daling ma-precipitate. Kini nga mga kristal magpahinabog dagkong pag-usab-usab sa kaepektibo sa pagkuha sa nucleic acid. Ang pagkadalidali sa mga organikong solvent dungan nga nagdugang. Sa 30°C, ang gidaghanon sa chloroform volatilization misaka sa 40% kumpara sa 25°C. Atol sa operasyon, gikinahanglan aron maseguro nga ang gikusgon sa hangin sa fume hood mao ang 0.5m/s, ug gamiton ang nitrile gloves aron mapadayon ang pagkaepektibo sa pagpanalipod.

Ang mga eksperimento sa PCR nag-atubang og mas komplikado nga mga kasamok sa temperatura. Ang mga reagents sama sa Taq enzyme ug reverse transcriptase hilabihan ka sensitibo sa kalit nga pag-usab-usab sa temperatura. Ang pagkondensasyon sa mga dingding sa tubo pagkahuman makuha gikan sa usa ka -20 ° C nga freezer mahimong hinungdan sa sobra sa 15% nga pagkawala sa kalihokan sa enzyme kung kini mosulod sa sistema sa reaksyon. Ang mga solusyon sa dNTP mahimo usab nga magpakita sa makit-an nga pagkadaot pagkahuman sa 5 minuto nga pagkaladlad sa temperatura sa kwarto (>30°C). Ang operasyon sa instrumento gibabagan usab sa taas nga temperatura. Kung ang temperatura sa palibot sa laboratoryo> 35 ° C ug ang clearance sa pagwagtang sa kainit sa instrumento sa PCR dili igo (<50 cm gikan sa dingding), ang kalainan sa internal nga temperatura mahimong moabot hangtod sa 0.8 °C. Kini nga pagtipas mahimong hinungdan sa pagkaayo sa amplification sa ngilit sa usa ka 96-well plate nga mahulog sa sobra sa 40%. Ang mga filter sa abog kinahanglan nga limpyohan kanunay (ang pagtipon sa abug makapamenos sa kainit sa pagkawagtang sa kahusayan sa 50%), ug ang direkta nga air conditioning kinahanglan likayan. Dugang pa, kung maghimo og mga eksperimento sa PCR sa tibuok gabii, likayi ang paggamit sa instrumento sa PCR isip usa ka "makeshift refrigerator" sa pagtipig sa mga sample. Ang pagtipig sa 4°C sulod sa kapin sa 2 ka oras mahimong hinungdan sa pagporma sa kondensasyon human masira ang gipainit nga taklob, nga makapatunaw sa sistema sa reaksyon ug posibleng makadaut sa metal modules sa instrumento.

Nag-atubang sa padayon nga taas nga temperatura nga mga pasidaan, ang mga molekular nga laboratoryo kinahanglan usab nga magpalanog sa alarma. Ang bililhon nga mga sample sa RNA kinahanglan nga tipigan sa likod sa usa ka -80 °C nga freezer, nga adunay access nga limitado sa taas nga temperatura nga mga panahon. Ang pag-abli sa pultahan sa usa ka -20°C nga freezer sobra sa lima ka beses sa usa ka adlaw makapasamot sa pag-usab-usab sa temperatura. Ang high-heat-generating equipment nanginahanglan ug labing menos 50 cm nga heat dissipation space sa duha ka kilid ug likod nga kilid. Dugang pa, girekomendar nga i-restructure ang experimental timing: 7:00-10:00 AM para sa mga operasyon nga sensitibo sa temperatura sama sa RNA extraction ug qPCR loading; 1:00-4:00 PM para sa non-experimental nga trabaho sama sa data analysis. Kini nga estratehiya epektibo nga makapugong sa taas nga temperatura nga mga taluktok nga makabalda sa mga kritikal nga lakang.

Ang mga eksperimento sa molekula sa panahon sa usa ka heatwave usa ka pagsulay sa teknik ug pailub. Ubos sa walay hunong nga adlaw sa ting-init, tingali panahon na nga ibutang ang imong pipette ug idugang ang dugang nga kahon sa yelo sa imong mga sample aron tugotan ang instrumento nga mawala ang dugang nga kainit. Kini nga pagtahud sa pag-usab-usab sa temperatura mao gayod ang labing bililhong kalidad sa laboratoryo panahon sa makapaso nga mga bulan sa ting-init—sa pagkatinuod, sa 40°C nga kainit sa ting-init, bisan ang mga molekula nagkinahanglan ug maampingong gibantayan nga “artipisyal nga polar nga rehiyon.”